欧美自拍另类欧美宗合图片区,国产视频一区二区三区四区,日本一区二区三区四区视频,婬片一区AAA毛片一区二区

2×Magic⁺PfuPreMIX說(shuō)明書(shū)

（Rev.C）

產(chǎn)品組成

產(chǎn)品說(shuō)明：本產(chǎn)品包含Pfu DNA聚合酶、dNTPs、MgCl₂、反應緩沖液、電泳指示染料，濃度為2×。具有超高保真性、靈敏度高、特異性強、穩定性好，無(wú)需額外添加Loading Buffer等優(yōu)點(diǎn)，可最大限度的減少使用者的工作強度，減少人為誤差。使用時(shí)只需加入DNA模板和引物并補足所需要的水即可。

產(chǎn)品內容：Pfu DNA Polymerase ：0.05units/?l ；MgCl₂： 4mM ；dNTPs (dATP, dCTP, dGTP, dTTP)：0.2mM；指示染料：0.05%。

質(zhì)量控制： SDS-PAGE檢測純度大于99%；經(jīng)檢測無(wú)外源核酸酶活性；PCR方法檢測無(wú)宿主殘留DNA；能有效擴增人類(lèi)基因組中的單拷貝基因；室溫放置一周，活性無(wú)明顯改變。

適用范圍：一般DNA片段的擴增、DNA標記、DNA序列測定。

建議的PCR反應體系：（以50μl反應體系為例）

50 μl PCR反應體系中模板DNA推薦使用量

建議的PCR反應條件

注意事項：

1、本產(chǎn)品提供的酶量可進(jìn)行多次反應，配置過(guò)程應將酶盡量放在冰上進(jìn)行。

2、PCR的反應液請在冰上配制，然后置于PCR擴增儀上進(jìn)行PCR反應。這種冷啟動(dòng)法（Cool Start Method）可增強PCR擴增的特異性，減少PCR過(guò)程中的非特異性反應，能得到良好的PCR結果。

3、PCR反應后，無(wú)需額外加入DNA Loading Buffer，可直接加入凝膠孔進(jìn)行電泳。

可能出現的問(wèn)題及解決方案：

1．假陰性，不出現擴增條帶
　　PCR反應的關(guān)鍵環(huán)節有①模板核酸的制備②引物的質(zhì)量與特異性③酶的質(zhì)量④PCR循環(huán)條件。尋找原因應逐個(gè)排除。

2．假陽(yáng)性
　　出現的PCR擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時(shí)其條帶更整齊，亮度更高。原因可能是引物設計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進(jìn)行PCR擴增時(shí)，擴增出的PCR產(chǎn)物為非目的性的序列。靶序列太短或引物太短，容易出現假陽(yáng)性。需重新設計引物。

3．出現非特異性擴增帶
　　PCR擴增后出現的條帶與預計的大小不一致，或大或小，或者同時(shí)出現特異性擴增帶與非特異性擴增帶。其原因：一是引物與靶序列不完全互補、或引物聚合形成二聚體。二是Mg²⁺濃度過(guò)高、退火溫度過(guò)低，及PCR循環(huán)次數過(guò)多有關(guān)。Mg²⁺濃度或者重新設計引物即可解決。

4．出現片狀拖帶或涂抹帶
　　PCR擴增有時(shí)出現涂抹帶或片狀帶或地毯樣帶。其原因往往由于酶量過(guò)多或酶的質(zhì)量差，dNTP濃度過(guò)高，Mg²⁺濃度過(guò)高，退火溫度過(guò)低，循環(huán)次數過(guò)多引起。也需逐個(gè)排除。