1.1多肽合成基本原理：

    先將所要合成肽鏈的羥末端氨基酸的羥基以共價(jià)鍵的結構同一個(gè)不溶性的高分子樹(shù)脂相連，然后以此結合在固相載體上的氨基酸作為氨基組份經(jīng)過(guò)脫去氨基保護基并 同過(guò)量的活化羧基組分反應，接長(cháng)肽鏈。重復（縮合→洗滌→去保護→中和及洗滌→下一輪縮合）操作，達到所要合成的肽鏈長(cháng)度，最后將肽鏈從樹(shù)脂上裂解下來(lái)， 經(jīng)過(guò)純化等處理，即得所要的多肽。其中α-氨基用BOC（叔丁氧羰基）保護的稱(chēng)為BOC固相合成法，α-氨基用FMOC（9-芴甲氧羰基）保護的稱(chēng)為 FMOC固相合成法。

    1.2固相多肽合成的步驟：

    A，樹(shù)脂的選擇及氨基酸的固定

    用于多肽合成的高分子的載體主要有3類(lèi)：交聯(lián)聚苯乙烯；聚酰胺：聚乙烯一乙二醇脂類(lèi)樹(shù)脂。氨基酸的固定主要是通過(guò)保護的氨基酸的羧基同樹(shù)脂的反應基團之間形成共價(jià)鍵來(lái)實(shí)現。

    B，氨基、羧基、側鏈的保護及脫除

    要成功合成具有特定的氨基酸順序的多肽，需要對暫不參與形成酰胺鍵的氨基和羧基加以保護，同時(shí)對氨基酸側鏈上的活性基團也要保護，反應完成后再將保護基團 除去，近年來(lái)，FMOC合成法得到了廣泛的應用。羧基通常用形成酯基的方法進(jìn)行保護。甲酯和乙酯是逐步合成中保護羧基的常用方法。

    C，成肽反應

    固相中的成肽反應一般是將兩個(gè)相應的氨基被保護的及羧基被保護的氨基酸放在溶液內并不形成肽鍵，要形成酰胺鍵，經(jīng)常用的手段是將羧基活化，變成混合酸酐、活潑酯、酰氯或用強的縮合劑（如碳二亞氨）形成對稱(chēng)酸酐等方法來(lái)形成酰胺鍵。

    D，裂解及合成肽鏈的純化

    BOC法用TFA+HF裂解和脫側鏈保護基，FMOC法直接用TFA，有時(shí)根據條件不同，其它堿、光解、氟離子和氫解等脫保護方法也被采用。合成肽鏈進(jìn)一步的精制、分離與純化通常采用高效液相色譜、親和層析、毛細管電泳等。

閱讀：  2016-06-24 08:56:23