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玉米赤霉烯酮偶聯(lián)抗原(完全抗原、酶標抗原)合成方法技術(shù)

玉米赤霉烯酮毒素屬于類(lèi)雌激素物質(zhì),靶器官為動(dòng)物的生殖器官。毒素能引起豬只雌激素亢進(jìn)癥,使豬的生殖器官機能和形態(tài)發(fā)生變化,導致小母豬乳房腫大、乳腺過(guò)早成熟、陰道及陰戶(hù)紅腫、陰門(mén)外翻、陰道脫出等,呈現霉菌性炎癥反應。種公豬睪丸萎縮、性欲下降、精子無(wú)活力等。目前,玉米赤霉烯酮的酶聯(lián)免疫法,免疫膠體金法等檢測方法均需要玉米赤霉烯酮抗原抗體。
(1)玉米赤霉烯酮半抗原合成(合成技術(shù)路線(xiàn)見(jiàn)下圖)
10-20mg玉米赤霉烯酮溶于丙酮中,在堿性溶液中與氯乙酸鈉反應,形成含有乙酸基團的玉米赤霉烯酮半抗原。

(2)玉米赤霉烯酮全抗原(人工抗原、完全抗原、酶標抗原)合成
玉米赤霉烯酮半抗原與牛血清白蛋白偶聯(lián)得到免疫抗原。
玉米赤霉烯酮半抗原用EDC活化,后將100mg蛋白加入0.01mpbs,溶解后與玉米赤霉烯酮半抗原偶聯(lián), 室溫攪拌1h,用0.01mol/LPBS透析3天,每天換3次透析液,得到玉米赤霉烯酮與牛血清白蛋白的免疫抗原。

閱讀:  2016-05-20 09:21:25  

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