近年來(lái)，人們逐漸認識到一種由內皮細胞釋放的血管活性 物質(zhì)可介導血管的
舒張反應，這種物質(zhì)被稱(chēng)為內皮細胞衍生舒張因子(EDRF)。由于這種物質(zhì) 的半衰
期很短，體外不易檢測,因而對它的確切構成一直不甚明了。1987年，Palmer和Mo
ncada等〔１,２〕分別證實(shí)EDRF與一氧化氮（NO）具有相同的屬性 ，進(jìn) 而證明這
種血管內皮細胞衍生舒張因子就是NO。體內血管內皮細胞、血小板、中性粒細胞、
 巨噬細胞、神經(jīng)組織在一定刺激下均可產(chǎn)生NO,近年研究表明，NO參與廣泛的生理
功能的 調節，如血壓調節、外周非腎上腺素能非膽堿能（NANC）神經(jīng)遞質(zhì)的傳遞
、免疫介導及防御 機制等，在急診危重癥患者的發(fā)病及治療中具有重要意義?，F
就有關(guān)NO在急診醫學(xué)領(lǐng)域 的研究加以綜述。?

1.NO的生物合成及NO合酶（NOS）

在NOS作用下,左旋精氨酸(L-Arg)在轉化為左旋胍氨酸的過(guò)程中 生成NO，多種物質(zhì)
可對這一過(guò)程產(chǎn)生影響。NO的半衰期很短，約5～10秒，它在體外迅速氧 化為NO２
－２和NO－３,因而目前直接檢測NO尚有一定難度，多以檢測其代謝產(chǎn)物NO２－２
、NO－３ 來(lái)代表NO 生成。NO亦可被氧自由基、血紅素及其它含血紅素的蛋白結合
加速滅活，而超氧化物歧化酶 （SOD）則抑制其滅活。NOS在NO合成過(guò)程中起著(zhù)重
要作用。目前已知NOS有兩種亞型，一種 是基礎型NOS?(c-NOS?)，另一種是誘生
型NOS(i-NOS)。c-NOS具有細胞內鈣依賴(lài)性，可被Ca２＋及鈣調蛋白激活,通過(guò)直接
刺激而產(chǎn)生N O。c-NOS廣泛? 存在于動(dòng)物的血管內皮細胞、血小板、中性粒細胞
、肥大細 胞及 神經(jīng)組織中，目前已從動(dòng)物的腦及內皮細胞中克隆出了c-NOS?的
基因。 i-NOS無(wú)鈣依賴(lài)性，是在細胞因子如白介素-1(IL-1)、腫瘤壞 死因子(TNF
)、 干擾素-γ(IFN－γ)、內毒素等誘導下由血管平滑肌細胞、巨噬細胞、心肌細
 胞、內皮細胞、成纖維細胞及上皮細胞產(chǎn)生的，由i-NOS作用產(chǎn)生的NO遠多于由 
c-NOS作用產(chǎn)生的NO，因而不同濃度NO具有不同的作用。NOS的抑制劑有L-單甲基精
氨酸(?L-NMMA?)、L-硝基精氨酸(?L-NOARG?)、L-硝基精氨酸甲酯(?L-NAME?
)及L-亞 胺基乙基鳥(niǎo)氨酸?(L-NIO?)，晚近已發(fā)現L-硝基精氨酸-?P-硝基苯胺(
L-NAPNA)具有選擇性抑制腦中NOS生成的作用 ，而對內皮細胞產(chǎn)生NOS 無(wú)抑制作用
。?

2.NO的生理作用及意義?

研究表明，NO具有強大的松弛血管平滑肌作用，在緩激肽、乙酰膽堿介導下，NO滲
入血管內 皮細胞基質(zhì)并擴散至平滑肌細胞，與細胞膜受體作用，激活鳥(niǎo)苷酸環(huán)化
酶(sGC)產(chǎn)生環(huán)鳥(niǎo)苷 酸(cGMP)，從而松弛血管平 滑肌，引起血管舒張。已經(jīng)證實(shí)
外周NANC神經(jīng)遞質(zhì)即是NO，雖然NO的半衰期只有5秒，但由 于NO能迅速在細胞間擴
散，且神經(jīng)傳遞的徑路很短，因此NO的半衰期相對于其它經(jīng)典的神經(jīng) 遞質(zhì)來(lái)說(shuō)則
較長(cháng)。NO具有高度親脂性，極易通過(guò)細胞膜，可直接進(jìn)入靶細胞。有人認為cNOS 
生成的NO可能先與含巰基的載體分子結合或形成硝基硫醇復合物，到達靶細胞后N
O從載體釋 放并直接擴散至靶細胞內，進(jìn)入靶細胞的NO與sGC中的Fe結合使之激活
，產(chǎn)生cGMP而發(fā)揮其 生物學(xué)效應。已經(jīng)證實(shí)巨噬細胞、中性粒細胞、上皮細胞等
均可在細胞因子及內毒素的作用 下，由i-NOS催化而合成NO，雖然由c-NOS合成的
少量NO有舒張血管 、支氣管作用，有助于炎癥的緩解，但由i-NOS合成的大量NO則
使呼吸道毛細血 管后靜脈漿細胞滲出增多，上皮細胞脫落，功能變性，甚至細胞
死亡，從而使炎癥反應加重 。?

3.NO在急診醫學(xué)的應用及進(jìn)展?

3.1NO與支氣管哮喘：
在哮喘發(fā)病過(guò)程中，淋巴細胞、嗜酸粒細胞、巨噬細胞、肥大細胞、成纖維細胞均
參與反 應，其病理表現為支氣管多種炎細胞浸潤、基底膜透明變性、上皮細胞損
傷脫落等。肥大細 胞主要參與哮喘的速發(fā)反應，而巨噬細胞、嗜酸粒細胞、中性
粒細胞的浸潤導致哮喘遲發(fā)反 應的發(fā)生。試驗表明哮喘患者呼出氣中NO含量較正
常人高2～3倍〔3〕；同時(shí)其肺中 的i-NOS免疫組化染色較非哮喘者明顯增強〔4〕
。研究證實(shí)，在哮喘患 者 血漿及豚鼠哮喘模型血漿、肺組織中NO含量顯著(zhù)高于對
照組[5-7]?。提示在哮喘發(fā)病中由于i-NOS合成增加而使誘生性NO生成增多。?
    在哮喘發(fā)病機制中，NO具有自相矛盾的雙重作用，一方面可舒張肺血管、支氣
管平滑肌，使 哮 喘癥狀減輕；另一方面大量NO合成則使其毒性作用加強，哮喘不
僅不能緩解，反而加重。由 于NO的這種特性及其在哮喘發(fā)病中的特殊作用，用吸
入小劑量NO或抑制誘生型NOS催化作用 使NO生成減少來(lái)治療哮喘已成為一種新的設
想。?
    由于i-NOS催化產(chǎn)生的大量NO使炎癥反應加重，如能找到一種有效的選擇性抑
制 i-NOS合成的物質(zhì)，可能有助于哮喘的治療。目前已知的NOS抑制劑L-NMMA、L-
NAME和L-NIO等均為非特異性抑制劑，在抑制i-NOS的同時(shí)也抑制c-NOS。我們的研
究證實(shí)，糖皮質(zhì)激素可抑制哮喘患者及 模型豚鼠體內NO的產(chǎn)生〔5，6〕。Rodoms
ki等〔８〕發(fā)現糖皮質(zhì)激素類(lèi)藥 物對i-NOS?有選擇性抑制作用，而對c-NOS無(wú)此
作用，提示糖皮 質(zhì)激素還 可能通過(guò)選擇性抑制體內i-NOS合成來(lái)控制哮喘。研究
發(fā)現〔９〕，胍 氨酸對i-NOS較其對c-NOS?的抑制作用強10～100倍。這也為 治
療哮喘藥物的發(fā)現提供了思路。?

3.2NO與急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)：炎癥細胞浸潤和激活是引起ARDS 的確切機制
。實(shí)驗表明，在由IgG免疫復合體所誘發(fā)的ARDS中，中性粒細胞起重要作用；而I 
gA免疫復合體所誘發(fā)的ARDS則是巨噬細胞依賴(lài)性的，但二者均是氧自由基和NO依賴(lài)
性的。近 年來(lái)隨著(zhù)對NO在體內作用研究的不斷深入，逐漸認識到NO有一未配對電
子并具有順磁性，極 易與Ｏ２結合形成超氧化氮陰離子（peroxynitrite anion，
NO）。NO在酸性條件下分解為NO２和OH,NO及其反應中間產(chǎn)物NOH是極強的氧化劑，
可導致脂質(zhì)過(guò)氧化和巰基氧化，從而產(chǎn)生細胞毒性作用〔１０〕。此時(shí)除氧自由 
基本身的毒性作用外，其與NO的反應產(chǎn)物NO可進(jìn)一步造成支氣管肺損傷。損傷的途
徑 可能為：①脂質(zhì)過(guò)氧化作用造成生物膜包括細胞器膜損傷。丙二醛(MDA)可與細
胞器膜成分 發(fā)生交聯(lián) 、聚合，改變膜的性質(zhì)，還可與DNA、RNA堿基交聯(lián)，產(chǎn)生細
胞毒性作用。②脂質(zhì)過(guò)氧化物和 Ｏ２抑制內皮細胞功能，引起肺血管舒縮障礙。
③花生四烯酸代謝產(chǎn)物增多，加劇炎 癥反應。④NO的強烈細胞毒作用。?
ARDS時(shí)，肺動(dòng)脈壓（PAP）升高是引起肺水腫和右心室功能不全的主要因素，降低
已升高的P AP及肺血管阻力（PVR）是重要的治療手段。有報道對重癥ARDS患者吸
入低濃度的NO可使ARD S患者平均肺動(dòng)脈壓下降，明顯提高氧分壓，降低生理死腔
氣體容積/潮氣容積〔１１〕。因而吸入NO 被譽(yù)為治療重癥ARDS的新療法。?

3.3 NO與休克：
    在內毒素休克早期，由于內毒素引起體內兒茶酚胺、5-羥色胺、血管緊張素的
 增加，使內皮細胞的c-NOS被激活，產(chǎn)生NO，導致血管對去甲腎上腺素的收 縮反
 應降低和急性血壓下降；而在休克晚期，在急性血壓下降部分恢復后，血壓的繼
續下降可能 與內毒素引起的血小板激活因子（PAF）、IL-1?等誘發(fā)血管平滑肌細
胞的i -NOS使NO產(chǎn)生增多有關(guān)，因而NO產(chǎn)生水平與預后及病死率密切相關(guān)，用NOS
的抑制劑 L-NMMA治療休克，具有較好療效〔１２〕。這為內毒素引起的休克治療
 展示了前景，同時(shí)由于腎上腺皮質(zhì)激素可降低休克的病死率，可能與其抑制NOS的
活性，減 輕血管內皮的損傷，從而阻止休克、彌散性血管內凝血(DIC)的發(fā)生和發(fā)
展有關(guān)。?

3.4NO與腦血管梗死：
    NO在神經(jīng)系統中具有下列生理功能：（1）調節神經(jīng)介質(zhì)的釋放；（2）由腦血
管內皮和腦血 管外膜自主神經(jīng)釋放的NO調節大腦的血流量；（3）通過(guò)神經(jīng)元中N
OS的激活而產(chǎn)生NO，影響 大腦中的小動(dòng)脈，從而調節大腦血流量。腦血管梗死時(shí)
，多種興奮性氨基酸釋放到細胞外間隙中，刺激N-甲基-D-天門(mén)冬氨酸受體，使細
胞外的鈣離子進(jìn)入神經(jīng)元內，激活NOS，使神經(jīng)元 產(chǎn)生 和釋放的NO增多。局灶性
腦缺血時(shí)，腦內也產(chǎn)生大量的NO。NO與O２反應，形成NO造成腦損害。動(dòng)物實(shí)驗表
明，如果在動(dòng)物腦缺血前給予SOD，可顯著(zhù)減少腦組織的梗死體積。但過(guò)量的NOS抑
制劑也可抑制腦血管內皮的NOS活性，使內皮細胞產(chǎn)生的NO減少，阻礙了 腦血管擴
張，并減少了對血小板粘附抑制作用，反而加重腦損傷。
?
4.NO的臨床應用?
    如前所述，目前臨床應用NO主要是采用吸入NO的方法來(lái)治療患者〔13〕。吸入
前，NO 氣體應與N2預混成(100～1 000)×１０－１２ mol/L?的濃度貯于鋼瓶中
，使用 前盡量縮短NO與O2的接觸時(shí)間 ，以減少NO２的生成，新鮮的Na2CO3可吸收
NO２，使其濃度降低。NO具有高度親脂 性，吸入NO不僅可直接到達肺泡產(chǎn)生血管
舒張作用，而且可穿過(guò)支氣管上皮屏障，到達支氣 管平滑肌從而使其舒張。Dupu
y等〔１４〕的研究證實(shí)，對乙酰甲膽堿誘發(fā)的支氣管 痙攣豚鼠吸入（5～300）×
１０－１２ mol/L的NO，其氣道痙攣可以逆轉，并具 有劑量依賴(lài)性。進(jìn)一步的研
究表 明，霧化吸入可釋放NO的S-硝基-N-甲基青霉胺也可使氣道阻力下降。Foube
rt等〔１５〕給哮喘和慢性阻塞性肺疾患(COPD)患者及健康對照組吸入80×１０－
１２mol/L的NO，發(fā)現哮喘組氣道反應性降低，而COPD組及 健康對照組則無(wú)此發(fā)現
。上述 研究雖表明吸入NO有舒張支氣管和降低氣道阻力作用，但吸入高濃度NO則
可產(chǎn)生毒性反應 。這主要因為NO可與氧結合形成二氧化氮（NO２ ），后者有很強
毒性作用。實(shí)驗表 明NO２濃度>50×１０－１２mol/L可立即引起肺水腫；如果NO
>5 000×１０－１２ mol/L時(shí)，NO還可與血紅蛋白迅速結合形成 高鐵血紅蛋白血
癥，并使表面活性物質(zhì)失活引起嚴重肺水腫。吸入低濃度（<50×１０－１２mol/
L）NO幾乎無(wú) 毒性反應，當吸入濃度<10×１０－１２mol/L時(shí)，血紅蛋白與NO結合
者占0. 13%，所形成的高鐵血紅蛋白占0.2% 。給兔吸入43×１０－１２ mol/L的
NO和3.6×１０－１２mo l/L的NO２(連續6日)后，光鏡下未見(jiàn)肺水腫； 給小鼠吸
入10×１０－１２mol/L的NO，6個(gè)月后未見(jiàn)高鐵血紅蛋白含量升高，但可見(jiàn) 脾臟
增大和膽紅素輕度增高。因此美國職業(yè)安全健康署規定工作時(shí)NO濃度應低于25×１
０－１２mol/L，目前治療患者時(shí)推薦吸入NO濃度應<50×１０－１２ mol/L。?

5.結論與展望?
綜上所述，NO是一種重要的病理生理因子，由于NO的兩面性作用使其在急危重癥疾
病的發(fā)病 及治療中具有重要意義，因而越來(lái)越受到重視。低濃度NO具有對血管、
支氣管平滑肌的舒張 作用，高濃度NO具有細胞毒性作用，表現為與血紅蛋白結合
生成高鐵血紅蛋白血癥及使肺泡表面物質(zhì)失活，細胞功能變性壞死，DNA脫氨基等
。目前在NO研究中仍有許多問(wèn)題需要解決 ，如：(1)一定濃度的NO具有舒張血管、
支氣管平滑肌作用，高濃度則產(chǎn)生組織及細胞毒性 作用，在治療中，如何使吸入
NO濃度達到最有效最安全的濃度，摒除其毒性作用。(2)如何 尋找一種選擇性抑制
i-NOS的物質(zhì)，使體內NO產(chǎn)生適量并發(fā)揮生理作用。(3)闡明NO與疾病發(fā)病過(guò)程中炎
細胞介質(zhì)和細胞因子之間的關(guān)系，確定NO在發(fā)病機制中的地位。相信隨著(zhù)對NO研究
的不斷進(jìn)展，這些問(wèn)題會(huì )逐步得到解決，從而為急診醫學(xué)領(lǐng)域的急危重癥 疾病的
研究和預防治療提供新的思路

閱讀：  2016-05-03 11:21:34