有效期:2個(gè)月
英文名稱(chēng):SephadexG-100medium
儲存條件:RT
外觀(guān)(性狀):白色粉末
單位:瓶
應 用:利用分子篩作用,進(jìn)行多肽分離、脫鹽、清洗生物提取液、分子量測定
性 狀:白色微球,多孔凝膠
類(lèi)型:凝膠過(guò)濾填料,親水型凝膠
結構成分:交聯(lián)右旋糖酐
粒 徑:40-120?m
工作PH值:2-10
操作溫度:4-40℃
球蛋白分離范圍:4000-150000
保存條件:4-25℃
化學(xué)和物理性質(zhì):葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠,含有大量的羥基,很容易在水中和電解質(zhì)溶液中溶脹。 G型的葡聚糖凝膠有各種不同的交聯(lián)度,因此它們的溶脹度和分級分離范圍也有所不同。 葡聚糖凝膠的溶脹度基本上不因鹽和洗滌劑的存在而受影響。葡聚糖凝膠有不同的粒度。超細級的葡聚糖凝膠是用于需要極高分辨率的柱色譜和薄層色譜。粗級和中級的凝膠用于制備性色譜過(guò)程,可在較低的壓力下獲得較高的流速。 另外,粗級也可用于批量工藝。
化學(xué)穩定性:葡聚糖凝膠不溶于一切溶劑(除非它被化學(xué)降解)。 它在水、鹽溶液、有機溶劑、堿和弱酸性溶液中都是穩定的,在強酸中凝膠骨架的糖昔鍵被水解。 長(cháng)期接觸氧化劑將破壞凝膠,因而應避免使用。
物理穩定性:葡聚糖疑膠并不熔融,可以在濕態(tài)、中性PH進(jìn)行滅菌或在高壓滅菌器120℃、30分鐘而不影響它的色譜性質(zhì)。 干態(tài)的凝膠加熱至120℃以上將開(kāi)始焦糖化。 葡聚糖凝膠的機械強度取決于交聯(lián)度。
使用方法:
葡聚糖凝膠預處理:在室溫下,將葡聚糖凝膠干粉浸泡于蒸餾水中至少24小時(shí),并不斷攪拌以保證凝膠溶脹,或者用蒸餾水煮沸至少1小時(shí)直至充分溶脹,凝膠體積不再變化。注:在溶脹前,加入蒸餾水攪拌后使其自然沉降,沉降后若上層溶液中漂浮的凝膠碎片顆粒較多,需要重復多次漂洗將其除去,防止層析時(shí)阻塞凝膠柱,影響流速。
裝柱:將溶脹好的凝膠根據裝柱要求一次性置入柱內,注意保持濕態(tài)裝柱,并避免柱內產(chǎn)生氣泡或斷層; 裝柱要均勻,可在凝膠耐受的操作壓下裝柱,裝好的凝膠柱可以檢測柱效,檢測過(guò)濾柱裝填是否合格。凝膠層析分離度取決于柱高,為分離不同組分,凝膠柱床必須有適宜的高度:分級分離時(shí),一般需要100cm左右長(cháng)的層析柱,柱高與直徑之比為20:1-100:1,柱高過(guò)高時(shí),凝膠擠壓變形阻塞會(huì )引起較大的反壓,應當盡可能避免;分組分離(例如脫鹽)時(shí)用短柱,柱高控制在40-50cm以下,柱高與直徑的比約為5:1-10:1。
平衡:上樣前用平衡液平衡層析柱至少3-5個(gè)柱體積直到記錄儀基線(xiàn)變得平穩為止(例如流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值);
上樣:分級分離時(shí)上樣量一般為5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積,視分離情況可以調整;脫鹽時(shí)上樣量可以達到20%的柱床體積。樣品溶液如有雜質(zhì)或沉淀應過(guò)濾或離心除去,樣品的粘度不能過(guò)高,否則影響分離效果。
洗脫方法:可以用無(wú)鹽水,也可以采用上柱時(shí)的緩沖液洗脫;在上柱緩沖液中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以完全分離純化;
在位清洗(CIP)凝膠使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床內沉淀的及頑固殘留的蛋白。 方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向清洗四個(gè)柱體積,再以至少三個(gè)柱體積平衡緩沖液再生。
保存凝膠柱暫時(shí)不用,可將其回收,一般方法是將凝膠用水沖洗干凈濾干,可加入0.02%疊氮化鈉防腐或用20%乙醇浸泡,以控制微生物生長(cháng)。
產(chǎn)品貨號:S1007