有效期:180天
別名:DEAE纖維素52;離子交換纖維素;DEAE纖維素DE52
英文名稱(chēng):CelluloseDE-52
CAS:9013-34-7
儲存條件:2-8℃
外觀(guān)(性狀):白色粉末
單位:瓶
DEAE-纖維素,它采用平均粒徑為50?m的顆粒型親水高分子聚合物,表面又用大分子糖鏈接枝,使它有更高的比表面積和更好的生物兼容性,保持更高載量,同時(shí)又具有更好的分辨率。由于比表面積大,平衡和洗脫的時(shí)間也更短。它經(jīng)過(guò)接枝即使是純化病毒,質(zhì)粒等超大分子的物質(zhì),載量基本保持不變。
填料特征:
特點(diǎn):載量大,分辨率好,使用方便。
性狀:白色或淡黃色纖維結塊狀
基質(zhì):高度交聯(lián)纖維素
配基:二乙基氨基乙基
配基密度:40μmol/ml
吸附載量:110mgHSA/ml
填料的顆粒大?。?0μm
最大流速:100cm/h
pH范圍:3-10,在位清洗時(shí)pH范圍可到2-11
化學(xué)穩定性:各種緩沖液及鹽,醋酸等
物理穩定性:0.1M中性緩沖液中,120℃30min
保存溫度:4℃
注意事項:
1、色譜柱裝填
(1)所需要用到的材料的溫度要與色譜操作的溫度一樣,液體最好做脫氣處理。填料可直接稱(chēng)量需要的量用緩沖液溶漲一小時(shí)裝柱即可,如果不好溶脹,可適當加熱。
(2)在柱子下端加入20%乙醇,以除去柱子中的空氣,關(guān)閉柱子出口,在柱內保留少量的20%乙醇。20%乙醇容易產(chǎn)生氣泡,可以在里面加1%吐溫避免氣泡產(chǎn)生。也可以換成純水裝柱子,但是需要把填料中的20%乙醇也換成純水,具體的方法取需要體積的填料在抽濾漏斗上進(jìn)行,也可以小心傾去填料上的20%乙醇,再換成5倍體積的純水,反復沉淀去上清,5次左右就可以用于裝柱子。
(3)此填料顆粒比較細,所以一定要注意柱子要選擇合適的篩網(wǎng),不能漏,也可以取點(diǎn)填料加到篩網(wǎng)上試試,如果沒(méi)有問(wèn)題再將填料連續倒入柱子時(shí),要用玻璃棒的緊靠柱子內壁引流,以減少氣泡的產(chǎn)生,讓填料先自然沉降到填料體積不再變化,而填料和上面的液體很好分層,上層溶液完全澄清,就可以開(kāi)泵用適當的流速壓柱子,填料體積不再變化后,再把轉換頭緊頂在填料上就可以平衡柱子使用。使用的流速要小于裝柱子的流速。
(4)在裝柱子前,填料從冰箱中取出至少要室溫放置2-3個(gè)小時(shí),這樣避免裝柱子時(shí)由于溫度變化而使柱子中產(chǎn)生氣泡。
2、蛋白的結合樣品的鹽濃度和pH要盡量和平衡柱子的緩沖液一致,鹽濃度過(guò)高或者pH帶低也許掛不上,所以要根據自己的樣品做適當調整。
3、蛋白的洗脫這個(gè)填料如果采用線(xiàn)性梯度洗脫,柱子的直徑和高度比最好是大于10,數值越大越有利于分離,而且樣品最好別上太多,可以按約10mg/ml上樣,如果采用階段洗脫的方法,裝短粗柱子就可以,上樣量也沒(méi)有限制。階段洗脫容易放大,重復性好,如果洗脫條件好完全可以得到和線(xiàn)性梯度一樣或者更好。采用什么方法完全根據自己需要。
4、再生清洗
(1)用完之后用0.1M醋酸洗5個(gè)柱體積,然后用2MNaCl洗5個(gè)床體積,再用水洗至中性,然后用20%乙醇保存。
(2)有機溶劑和水混合很容易產(chǎn)生氣泡,為了避免這樣情況,可以把配好的有機溶劑在室溫放置過(guò)夜,再使用,這樣可以避免氣泡進(jìn)柱子而導致柱子不能正常使用。特別注意:上樣之前,樣品至少用0.45微米膜過(guò)濾,盡量去除色素,否則色素會(huì )被吸附到填料上,影響填料的正常使用。在使用過(guò)程中,不能使用強酸強堿,酸和堿的濃度應低于0.15摩爾。
產(chǎn)品貨號:S1001