預期應用:本試劑盒用于微生物菌體,飼料、魚(yú)、蝦和肉類(lèi)組織(如雞、牛肉和豬肉),雞蛋、蜂蜜、 牛奶、血清和尿樣中菊粉(Inulin)殘留的定量檢測。
實(shí)驗原理:本試劑盒采用競爭ELISA方法,在微孔板包被有菊粉(Inulin)偶聯(lián)抗原,加入菊粉(Inulin) 標準品或樣品,游離菊粉(Inulin)與微孔條上預包被的菊粉(Inulin)偶聯(lián)抗原互相競爭抗 菊粉(Inulin)抗體酶標記物,用TMB底物顯色,加入終止液后顏色由藍色變?yōu)辄S色,用酶標儀在450nm波長(cháng)下進(jìn)行檢測,吸光值與樣品中菊粉(Inulin)含量成反比,通過(guò)標準曲線(xiàn)計算樣品中菊粉(Inulin)的含量。
試劑盒內容:
1.預包被的菊粉(Inulin)偶聯(lián)抗原的可拆酶標板:1塊(12孔×8條)
2.菊粉(Inulin)標準品:6瓶(1ml/瓶),含量分別是: 0 ppb,0.1 ppb,0.3 ppb,0.9 ppb,2.7 ppb,8.1 ppb
3.抗菊粉(Inulin)抗體酶結合物:1瓶(6ml)
4.顯色液A:1瓶(6ml)
5.顯色液B:1瓶(6ml)
6.終止液:1瓶(6ml),2M硫酸
7.樣本稀釋液:1瓶(10×, 6ml),用于樣品稀釋用
8.濃縮洗滌液:1瓶(20×,20ml),用于洗板
9.說(shuō)明書(shū)一份
操作步驟:
1 實(shí)驗須知
1.1 實(shí)驗開(kāi)始前請將所有試劑于盒外充分恢復至室溫(25±2℃),時(shí)間約2小時(shí)?;販刂潦?溫(25±2℃)后再取出微孔條,多余的微孔條重新密封立即于2-8℃干燥保存 注:一定保證回溫充分,否則影響檢測的精確度和準確度。
1.2 使用后請立即將試劑放回2-8℃保存。
1.3 請不要改變分析程序。
1.4 請使用精確的微量移液器。
1.5 操作一旦開(kāi)始,請不要中斷任何程序。
1.6 ELISA結果的可重復性極大程度的取決于操作程序,請嚴格按照要求操作。
1.7 為避免交叉污染,每個(gè)標準品和樣品均應使用不同的吸頭加樣。
1.8 加樣時(shí)請勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內表面。
2 分析步驟
2.1 預先進(jìn)行編號,標記B0、標準品和樣品的位置,推薦進(jìn)行雙孔檢測。
2.2 取所需數量的微孔(微孔條可拆),將多余板條重新密封并立即放回2-8℃保存。
2.3 樣品稀釋液(10×)、濃縮洗滌液(20×)稀釋成工作液(蒸餾水或去離子水稀釋)。
2.4 在B0孔中加入50?l 0.0ppb標準品溶液。
2.5 在各標準孔中加入50μl的標準品溶液。
2.6 在各樣品孔中加入50?l樣品溶液。
2.7 在所有孔中加入50?l的抗菊粉(Inulin)抗體酶結合物。
2.8 輕輕晃動(dòng)反應板幾秒鐘。
2.9 37℃溫浴30min (溫浴過(guò)程中不時(shí)輕拍反應板,可以減少雙孔誤差)。
2.10 甩掉孔中液體,用洗液洗滌微孔板5次,最后一次應在吸水紙上拍打以完全除去孔中液體。
2.11 洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個(gè)微孔中先加入50?l顯色液A,再加50?l顯色液B;輕微晃動(dòng)反應板使之徹底混勻。
2.12 37℃溫浴10min。
2.13 每孔中加入50?l終止液,混勻。
2.14 在450nm下檢測吸光度,結果在5min內讀取。
試劑盒性能:
1.本試劑盒檢測下限為0.05ppb
2.B0吸光度最佳值應大于1.0
3.試劑盒吸光度板內誤差小于8%,板間誤差小于15%。
4.用本說(shuō)明書(shū)提供的組織樣本提取方法回收率大于80%。
5.試劑盒提供的標準曲線(xiàn)范圍為0.1ppb-8.1ppb。
6.特異性: 與菊粉(Inulin)交叉反應為 100%
產(chǎn)品貨號:11649