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本試劑盒采用獨特的脫腐緩沖液體系，可將土壤樣本中的腐殖酸、棕黃酸盡可能去除，并且配有得玻璃珠可有效破碎土壤樣本中的各種復雜成分，保證從土壤樣本中提取基因組DNA的完整性。使用本試劑盒提取的DNA雜質(zhì)少、完整性好，可直接用于PCR、酶切等其他分子生物學(xué)下游實(shí)驗。

【使用說(shuō)明】

1.      裂解緩沖液、Solution S1、Solution S2、Solution S3在低溫條件下會(huì )產(chǎn)生沉淀，使用前放入37℃水浴，完全溶解后使用。

2.      所有離心步驟均為使用臺式離心機室溫下進(jìn)行離心。

【提取步驟】

1.     取0.25g玻璃珠和500ul 裂解緩沖液至2ml離心管中。

2.     向上述2 ml離心管中加入0.25-0.5g土壤樣品，渦旋混勻。

3.     向離心管中加入60 ul Solution S1，渦旋混勻，65℃水浴10min后劇烈渦旋震蕩10min。

v  為獲得更好的裂解效果，可適當延長(cháng)水浴和渦旋震蕩時(shí)間

4.     10,000 rpm離心3min，轉移上清（約400ul）至新的2ml離心管中。

v  由于劇烈震蕩，離心后上層可能會(huì )有泡沫，建議轉移上清時(shí)采用傾倒的方式，盡量不要將泡沫轉移到新的離心管中。

5.     向上清中加入3倍體積的Solution S2，上下顛倒混勻，12,000 rpm離心1min。

6.     轉移上清至新的2ml離心管中，加入1/4體積的異丙醇，上下顛倒混勻。

7.     將上一步溶液加到吸附柱中，12,000 rpm離心30s。

v  吸附柱最大載量700ul，請分多次過(guò)柱。

8.     棄廢液，向吸附柱中加600μl Solution S3，12,000 rpm離心1min。

9.     向吸附柱中加入600μl漂洗液 WB（請先檢查是否已加入無(wú)水乙醇!），12,000rpm 離心30s，棄掉廢液。

10.  向吸附柱中加入400μl 漂洗液WB, 12,000 rpm離心30秒，棄掉廢液。

11.  將吸附柱放回空收集管中，12,000 rpm離心1min，盡量除去漂洗液。

v  漂洗液中乙醇的殘留會(huì )影響后續的酶反應（酶切、PCR等）實(shí)驗。也可以將吸附柱開(kāi)蓋，置于室溫放置數分鐘，以徹底晾干吸附材料中殘余的乙醇。

12.  小心取出吸附柱，放入一個(gè)滅菌的離心管中，在吸附膜的中間部位加 50ul 洗脫緩沖液EB或者TE（洗脫緩沖液事先在60-70℃浴中加熱效果更好），室溫放置 2 分鐘，12,000rpm離心1min。如果需要較多量DNA，可將得到的溶液重新加入離心吸附柱中，再離心1min。

v  洗脫體積越大, 洗脫效率越高。如果需要DNA濃度較高, 可以適當減少洗脫體積,但是最小體積不應少于 30ul。

v  本試劑盒提供兩種洗脫液EB和TE。EB（10mM Tris-HCl ，pH8.0），不含EDTA，不影響下游酶切、連接等反應。如DNA需長(cháng)期保存，可以用TE（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH8.0）洗脫，但是EDTA可能影響下游酶切反應。